Questão nº 68
Questão de Farmácia · FGV PM-AM 2021 (nº 68)
FGV2021Oficial da PM - Farmacêutico-BioquímicoFarmácia
Gabarito: Cver comentário ↓
O imunoensaio enzimático (IEE) é uma técnica empregada para detectar um anticorpo de um determinado antígeno. Sobre essa metodologia, assinale a afirmativa correta.
- AComo vantagem, pode-se afirmar que a atividade enzimática não pode ser afetada por constituintes do plasma.
- BNesses tipos de ensaios, invariavelmente, os anticorpos são fixados à fase sólida, nunca o antígeno.
- CDentre as enzimas mais utilizadas estão a peroxidase de raiz forte, a beta-galactosidase e a fosfatase alcalina. (alternativa correta)
- DOs cromógenos mais utilizados são a ortofenilenodiamina (OPD), ácido 5-amino-salicílico, ortotoluidina, 2,2-diazino do ácido etilbenzotialino sulfônico (ABTS) e tetrametilbenzidina (TMB), que também se constituem nos substratos das enzimas presentes nos conjugados.
- EApesar do nome utilizado, não existem enzimas envolvidas nesta metodologia, somente anticorpos.
Resposta comentada
Gabarito Alternativa C
O imunoensaio enzimático (ELISA) é uma técnica laboratorial que utiliza enzimas ligadas a anticorpos ou antígenos para detectar e quantificar a presença de uma substância específica (o analito) em uma amostra. A enzima reage com um substrato para produzir um sinal detectável (geralmente uma mudança de cor), indicando a presença e a quantidade do analito.
- (A) Incorreta: A atividade enzimática pode sim ser afetada por diversos constituintes do plasma (como inibidores, proteases, variações de pH), o que pode gerar interferências nos resultados.
- (B) Incorreta: Em ensaios ELISA, tanto anticorpos quanto antígenos podem ser fixados à fase sólida, dependendo do formato do ensaio (ex: ELISA indireto fixa o antígeno; ELISA sanduíche fixa um anticorpo). A palavra "invariavelmente" e "nunca" tornam a afirmativa falsa.
- (C) Correta: A peroxidase de raiz forte (HRP), a beta-galactosidase e a fosfatase alcalina (ALP) são, de fato, as enzimas mais frequentemente utilizadas como marcadores em conjugados de ELISA devido à sua alta atividade catalítica, estabilidade e disponibilidade de substratos cromogênicos.
- (D) Incorreta: Os cromógenos listados (OPD, ABTS, TMB) são realmente muito utilizados, especialmente com a peroxidase de raiz forte. No entanto, a armadilha está na segunda parte da frase: "que também se constituem nos substratos das enzimas presentes nos conjugados". Embora os cromógenos sejam um tipo de substrato que produz cor, a afirmação é imprecisa e incompleta. Nem todos os substratos são cromógenos (ex: peróxido de hidrogênio é substrato da HRP, mas não é cromógeno). Além disso, a lista não inclui outros cromógenos importantes para as outras enzimas (ex: pNPP para fosfatase alcalina ou ONPG para beta-galactosidase). A frase generaliza de forma incorreta que esses cromógenos são os substratos para todas as enzimas dos conjugados.
- (E) Incorreta: O próprio nome "ELISA" (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) indica a presença e a importância das enzimas na metodologia. Elas são essenciais para gerar o sinal detectável.
Fonte: FGV PM-AM 2021 Oficial da PM - Farmacêutico-Bioquímico (Caderno Tipo 1). Reproduzida para fins de estudo.