Questão de Biomedicina · FGV FHEMIG 2023 (nº 37)

O diagnóstico molecular em doenças como as leucemias busca alterações genéticas (no DNA) ou na expressão gênica (no RNA) para entender a doença, prever seu comportamento e monitorar o tratamento. A estabilidade dessas moléculas é crucial para a qualidade dos testes.

• Primeira afirmativa (F): No diagnóstico molecular, o RNA é o componente mais estável, podendo ser facilmente extraído de células frescas ou congeladas, sendo o material preferido para a maioria dos ensaios de reação em cadeia da polimerase (PCR), sequenciamento e micro arranjos genômicos.

  • Análise: Esta afirmativa é falsa. O DNA é significativamente mais estável que o RNA. O RNA é muito lábil (instável) e facilmente degradado por enzimas chamadas RNases, que são ubíquas. Embora o RNA seja extraído para ensaios específicos (como detecção de transcritos de fusão ou expressão gênica), ele não é o "componente mais estável" nem o "material preferido para a maioria dos ensaios" de forma geral, especialmente quando se considera a análise do genoma (DNA).

• Segunda afirmativa (F): O DNA somente é estável, por algumas semanas, quando armazenado congelado (-80C).

  • Análise: Esta afirmativa é falsa. O DNA é uma molécula extremamente estável. Quando armazenado a -20°C ou -80°C, o DNA pode ser preservado por anos ou até décadas sem degradação significativa. A afirmação de que é estável "somente por algumas semanas" mesmo a -80°C subestima drasticamente a estabilidade do DNA e é um distrator que explora a falta de conhecimento sobre a longevidade das amostras de DNA.

• Terceira afirmativa (V): O RNA é mais lábil do que o DNA, podendo ser rapidamente degradado em amostras não processadas de sangue e medula óssea. Por outro lado, o RNA é o material mais adequado para detectar transcritos de fusão, os quais podem se apresentar em malignidades hematológicas.

  • Análise: Esta afirmativa é verdadeira. O RNA é de fato mais lábil (instável) que o DNA e se degrada rapidamente se as amostras não forem processadas e armazenadas corretamente. No entanto, para a detecção de transcritos de fusão (como o BCR-ABL na Leucemia Mieloide Crônica), que são produtos de fusão de genes no nível do RNA mensageiro, o RNA é o material de partida essencial. Ele é usado para a síntese de DNA complementar (cDNA) via transcriptase reversa, que então é amplificado por PCR (RT-PCR).

Análise das Alternativas:

(A) Incorreta: F – V – F. (A segunda afirmativa está incorreta, não verdadeira).
(B) Incorreta: F – V – V. (A segunda afirmativa está incorreta, não verdadeira).
(C) Incorreta: V – F – F. (A primeira afirmativa está incorreta, não verdadeira).
(D) Incorreta: V – V – F. (A primeira e a segunda afirmativas estão incorretas, não verdadeiras).
(E) Correta: F – F – V. Esta sequência corresponde à análise correta das três afirmativas.