Questão nº 83
Questão de Genética Forense · CEBRASPE PF 2025 (nº 83)
No que concerne às técnicas de sequenciamento de DNA, julgue os itens seguintes.
O sequenciamento de Sanger é um método fundamental para determinar a ordem dos nucleotídeos no DNA por meio da utilização de DNA polimerase, primers e ddNTPs fluorescentes, que interrompem a síntese do DNA de forma controlada.
Resposta comentada
O sequenciamento de Sanger (ou método didesoxi) descobre a ordem das letras do DNA sintetizando fitas novas com a DNA polimerase, que precisa de um primer (pequeno pedaço inicial de DNA) para começar. A sacada é misturar ddNTPs (nucleotídeos "defeituosos", sem o grupo 3'-OH) junto com os dNTPs normais: quando um ddNTP entra, a fita para de crescer naquela posição. Como cada ddNTP tem um fluoróforo (cor) diferente, dá pra ler a ordem dos nucleotídeos por eletroforese/capilar.
- Correta: Certo. O item descreve exatamente os três componentes essenciais do Sanger — DNA polimerase, primer e ddNTPs fluorescentes que interrompem a síntese de forma controlada — e o objetivo (determinar a ordem dos nucleotídeos).
Fica de olho: a banca costuma trocar ddNTP por dNTP (ou dizer que os dNTPs é que interrompem a síntese). Lembre: quem para a reação é o didesoxi (ddNTP), porque falta o 3'-OH; o dNTP normal apenas continua a cadeia.
Fonte: CEBRASPE PF 2025 Perito Criminal Federal - Genética Forense. Reproduzida para fins de estudo.