Questão de Patologia Clínica · FGV FHEMIG 2023 (nº 31)

A citometria de fluxo é uma técnica laboratorial que analisa rapidamente características físicas e químicas de células ou partículas em suspensão, uma a uma, enquanto elas passam por um feixe de laser. Ela é amplamente usada para identificar e quantificar diferentes tipos celulares.

• (A) Incorreta: A afirmativa I está correta, mas a II está incorreta.
• (B) Incorreta: A afirmativa II está incorreta.
• (C) Incorreta: A afirmativa II está incorreta.
• (D) Correta:
  • I. A técnica de imunofluorescência permite diferenciar linfócitos CD4 e CD8 e sua contagem absoluta pode ser realizada por citometria de fluxo. Esta afirmativa está correta. A imunofluorescência, utilizando anticorpos marcados com fluorocromos contra os marcadores CD4 e CD8, é a base para a identificação e quantificação desses subtipos de linfócitos T pela citometria de fluxo, sendo uma aplicação diagnóstica fundamental, por exemplo, no monitoramento de pacientes com HIV.
  • III – Os citômetros de fluxo permitem a diferenciação de células por sua morfologia, utilizando parâmetros como tamanho e granulosidade. Esta afirmativa está correta. Os citômetros de fluxo medem a dispersão da luz (forward scatter - FSC para tamanho, e side scatter - SSC para granulosidade/complexidade interna) quando o laser atinge as células. Esses parâmetros físicos são essenciais para a diferenciação inicial de populações celulares como linfócitos, monócitos e granulócitos.
• (E) Incorreta: A afirmativa II está incorreta. A armadilha aqui é a confusão entre imunofluorescência direta e indireta. No método indireto, o anticorpo primário (direcionado ao antígeno) não é marcado; um segundo anticorpo, marcado com fluoróforo, se liga ao primário. A descrição na afirmativa II ("anticorpo direcionado para este antígeno, marcado a um fluoróforo") refere-se à imunofluorescência direta.