Questão de Biologia · FGV MPMS 2012 (nº 76)

Enzimas de restrição são proteínas que atuam como "tesouras moleculares", cortando o DNA em sequências específicas, chamadas sítios de restrição. A eletroforese em gel é uma técnica que separa os fragmentos de DNA resultantes desses cortes por tamanho: fragmentos menores migram mais rapidamente e mais longe no gel do que fragmentos maiores, que ficam mais próximos ao ponto de partida.

• Análise do Alelo I: O problema informa que o Alelo I, quando tratado com a enzima Hind III, resulta em três fragmentos (x, y, z) de tamanhos diferentes. Isso significa que o Alelo I possui dois sítios de corte para a enzima Hind III.
• Análise da Enzima e Mutação: A enzima Hind III corta o DNA na sequência AAGCTT (o problema simplifica para "entre duas adeninas, quando a sequência de bases AAG está presente", referindo-se ao corte A^AGCTT). O Alelo II difere do Alelo I por uma única base nitrogenada. Na posição onde o Alelo I tem AAGCTT, o Alelo II tem AAGCTG (a última base T foi substituída por G). Essa mudança (T para G) na sequência AAGCTT faz com que o sítio de reconhecimento da Hind III seja eliminado nesse local.
• Consequência para o Alelo II: Se o Alelo I tinha dois sítios de corte e a mutação no Alelo II eliminou um desses sítios, o Alelo II passará a ter apenas um sítio de corte funcional. Um único sítio de corte resultará na produção de dois fragmentos de DNA.
• Comparação com as Alternativas: Apenas a alternativa A mostra dois fragmentos resultantes da eletroforese. As outras alternativas mostram três fragmentos, o que seria o caso se o número de sítios de corte não fosse alterado ou se um novo sítio fosse criado.

(A) Correta: A mutação no Alelo II (T para G na sequência AAGCTT) elimina um dos dois sítios de restrição da enzima Hind III presentes no Alelo I. Com apenas um sítio de corte restante, o DNA é clivado em dois fragmentos, conforme ilustrado na eletroforese.
(B) Incorreta: Esta alternativa mostra três fragmentos, o que não é consistente com a perda de um sítio de corte.
(C) Incorreta: Esta alternativa mostra três fragmentos, o que não é consistente com a perda de um sítio de corte.
(D) Incorreta: Esta alternativa mostra três fragmentos, o que não é consistente com a perda de um sítio de corte.
(E) Incorreta: Esta alternativa mostra três fragmentos, o que não é consistente com a perda de um sítio de corte.

Armadilha do distrator (B, C, D, E): A principal armadilha é não perceber que a eliminação de um sítio de corte reduz o número de fragmentos. Muitos alunos podem focar apenas na mudança de tamanho dos fragmentos, sem considerar que a perda de um sítio de corte significa que dois fragmentos adjacentes se fundirão em um único fragmento maior, diminuindo o número total de bandas no gel.